醬油中黃曲霉毒素應(yīng)用案例

樣品提取：

? 稱取5g醬油樣品于50mL離心管中，用提取液（純乙腈）定容到25mL，渦旋混勻

? 超聲提取20min，放入離心機(jī)（8000r/min離心20min），取上清液作為樣品提取液

樣品凈化：

? 步驟1：向試管中加入5mL樣品提取液

? 步驟2：將凈化柱橡膠頭從試管頂端插入試管中，并向下壓凈化柱至試管底端

? 步驟3：將凈化柱上部?jī)艋蟮臉悠诽崛∫旱钩鲋翗悠菲炕?/span>EP管中

? 步驟4：取2mL凈化提取液，氮吹至干，用1mL或0.5mL初始流動(dòng)相復(fù)溶，過微孔濾膜，上機(jī)分析

HPLC檢測(cè)條件：

? 流動(dòng)相：A相，水；B相，乙腈-甲醇（50:50，v:v）

? 等梯度洗脫條件：A，68%；B，32%

? 色譜柱：C18柱（柱長(zhǎng)150mm，柱內(nèi)徑4.6mm，填料粒徑5μm）

? 流速：1.0mL/min

? 柱溫：40℃

? 進(jìn)樣量：50μL

? 熒光檢測(cè)：激發(fā)波長(zhǎng)：360nm；發(fā)射波長(zhǎng)：440nm，光化學(xué)柱后衍生

實(shí)驗(yàn)結(jié)果：

黃曲霉毒素混標(biāo)液相色譜圖

(AFG1和B1濃度為2ng/mL；AFG2和B2濃度為0.6ng/mL）

醬油陰性樣品與陰性加標(biāo)樣品對(duì)比圖

(AFG1和B1加標(biāo)濃度為4ng/g；AFG2和B2加標(biāo)濃度為1.2ng/g)

醬油樣品最低檢出限、加標(biāo)回收率與重復(fù)性

(AFG1和B1加標(biāo)濃度為4ng/g；AFG2和B2加標(biāo)濃度為1.2ng/g)