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酸奶中黃曲霉毒素應(yīng)用案例
樣品提取：
? 稱取4g酸奶樣品于50mL離心管中，加入10mL提取液（純乙腈）混勻
? 渦旋6min，放入離心機（8000r/min離心10min），取上清液作為樣品提取液
樣品凈化：
? 步驟1：向試管中加入5mL樣品提取液
? 步驟2：將凈化柱橡膠頭從試管頂端插入試管中，并向下壓凈化柱至試管底端
? 步驟3：將凈化柱上部凈化后的樣品提取液倒出至樣品瓶或EP管中
? 步驟4：取2mL凈化提取液，氮吹至干，用1mL或0.5mL初始流動相復(fù)溶，過微孔濾膜，上機分析
HPLC檢測條件：
? 流動相：A相，水；B相，乙腈-甲醇（50:50，v:v）
? 等梯度洗脫條件：A，68%；B，32%
? 色譜柱：C18柱（柱長150mm，柱內(nèi)徑4.6mm，填料粒徑5μm）
? 流速：1.0mL/min
? 柱溫：40℃
? 進樣量：50μL
? 熒光檢測：激發(fā)波長：360nm；發(fā)射波長：440nm
實驗結(jié)果：
黃曲霉毒素標液相色譜圖
(AFM1為5ng/mL）
酸奶陰性樣品與陰性加標樣品對比圖
(AFM1加標濃度為10ng/g)
酸奶樣品最低檢出限、加標回收率與重復(fù)性
(AFM1加標濃度為10ng/g)
黃曲霉毒素 | 最低檢出限（ng/g） | 回收率（%） | 重復(fù)性RSD（n=3,%） |
AFM1 | 0.04 | 118.3 | 2.14 |
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